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Problème d'extraction d'ARN




  1. #1
    Bouetos

    Problème d'extraction d'ARN

    Bonjour, je cherche à extraire de l'ARN à partir d'hémolymphe d'escargot d'eau douce (limnée) avec un kit Qiagen RNeasy mais je n'obtient rien au final, alors que ça fonctionne très bien sur des tissus de limnée. Je soupçonne le mucus présent dans l'hémolymphe de colmater les colonnes, est ce que quelqu'un sait comment je pourrais m'en débarrasser?
    A priori, une extraction au Trizol permet d'éviter les problèmes dus au mucus mais ça m'arrangerait vraiment d'utiliser le kit...

    -----


  2. #2
    LXR

    Re : Problème d'extraction d'ARN

    Bonjour et bienvenue sur Futura Sciences,

    Si je ne me trompe pas, les mucus sont généralement constitués de polysaccharides. Normalement dans les kits d'extraction d'ARN, il y a une étape de solubilisation dans de l'éthanol 70%. Essayes peut-être de répéter cette étape, qui permet en priorité de se débarrasser des protéines en les précipitant, mais cela peut peut-être aider à se débarrasser aussi des polysaccharides du mucus... mon hypothèse est fragile mais je ne vois pas mieux dans l'immédiat.

    Greg

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