PCR niché

[invite23f1d2f4]

Bonjour
je ne crois pas que cette question a déjà été posé (sinon veuillez m'en excuser).
J'aurais voulu savoir en quoi consistait vraiment la PCR niché ? et en quoi diffère-t-elle de la classique PCR?
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[Anetheron]

Bonjour,

On utilisera dans ce cas deux couples d'amorces, au lieu d'un seul.

Le premier amplifiant une séquence A pendant les premiers cycles. Les amorces utilisées sont généralement peu spécifiques et vont amplifier quelques fragments. Le second couple, ajouté ensuite au milieu réactionnel pour les cycles restants, est spécifique d'une séquence B portée par un des fragments pré-amplifiés. Seul un des fragments sera donc réellement amplifié.

Ça permet essentiellement d'avoir une spécificité améliorée (la séquence amplifiée après action des deux couples de primers doit comporter la séquence des deux couples).