Electrophorese gel d'agarose

[Hist6]

Bonjour
Je fais un peu fleurir les topics mais la j'suis tellement nul en bio mol..
Si quelqu'un peut m'expliquer en quoi consiste une "Electrophorese en gel d'agarose", et comment interpréter les résultats ensuite sur l'autoradiographie

Merci
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[cecile_95]

Bonjour,
pour faire une electrophorese sur gel d agarose on prend du gel d agarose auquel tu rajoute du bet (bromur d ethidium) on fait un puit dns le gel (dans lequel on mettra l echantillon) on met l ensemble dans une solution (un tempon de migration).
De chaque cote de la cuve on place une electode (une + et une -) l adn etant charge negativement celui ci va migrer vers le +.
On visualisera la migration de l adn sous une l ampe u.v.
L adn surenroule migre le pus vite vient apres le lineaire puis le circulaire (etant plus encombran il migre moins vite que les autres)

[Edelweiss68]

Illustrations en images : http://www.sos-svt.com/documents/c4_...07cb85049655a4

[inviteb3bd5afc]

Bonjour,

le principe de l'électrophorèse est de faire migré l'ADN a laide d'un courant électrique a travers le gel. Comme dit, au dessus l'ADN a été introduit dans un petit trou dans le gel appelé puits, placé du coté de la l'anode (-).
Le courant électrique fait se déplacer l'ADN dans le gel vers la cathode (+).
Les plus grands morceaux (séquences) migrent très peu car elle sont retenu par le gel qui agit un peu comme un filet.
Les plus petites elles migrent très vites.

Ensuite tu as des ADN dit circulaire dont la forme les ralentissent beaucoup.
Et tu as l'ADN super enroulé qui ressemble au fil en spirales d'un téléphone (fixe évidemment). Lui occupe un espace très faible donc il migre beaucoup.


Au final cette technique permet de mesurer la taille de ton ADN en kilo paires de base en général.

C'est pourquoi dans un des puits on verse une solution de marqueur de taille. C'est un cocktail de plusieurs ADN dont on connait la taille.

Après migration tu observe une ou plusieurs bandes, tu compare la distance puits/bande à celle de ton ADN à celui du marqueur et tu peu déterminer sa taille.

Voila!

[A voir en vidéo sur Futura]

[Edelweiss68]

Attention : L'anode est (+) et la cathode (-).

[Hist6]

Merci a vous

j'ai un probleme avec mon ordi j'arrive pas a ouvrir les pdf, j'vais essayer de chercher d'autres illustrations sur le net

Mais comment j'vais trop me chier demain

[Edelweiss68]

C'est avec Google chrome que vous ne pouvez pas les ouvrir ? Parce que ça m'est déjà arrivé et avec Firefox ça marche très bien.

[Hist6]

Avec IE, je viens d'essayer de l'ouvrir avec firefox, mais ça me fait la même, c'est pas grave