extraction ARN

[vdurseld]

Bonjour à tous,

Je rencontre un petit problème de manip au labo, j espère pouvoir trouver de l'aide ici!
Mon but est d'extraire l'ARN de cellules péritonéales pour faire une RT et ensuite une PCR.
Le problème c'est que mon extraction avec le Tripure à un rendement faible et ensuite ma PCR ne donne pas de résultats. Enfait le signal de mon blanc est plus élevé que pour mes cellules péritonéales. Je pense peut-être à la présence d'un inhibiteur ??

Je ne sais pas trop quoi faire ni quelle technique d'extraction utiliser pour remplacer le tripure, tous vos conseils sont les bienvenus

Merci beaucoup
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[Aqualung]

Pour ma part le trizol fonctionne très bien (avec un peu d'azote liquide sous la main au cas où...)

[vdurseld]

Bonjour,

Vous faites l'extraction d'ARN de cellules de lavage péritonéal ou de tissu?

J'ai des résultats avec la méthode d'extraction par colonne, par contre toujours rien pour le Tripure. Connaissez vous un kit permettant d'éliminer les éventuels inhibiteurs de pcr présents dans le tripure??