L'uréase augmente la vitesse d'hydrolyse de l'urée(CH4N2O) d'un facteur de 108 . Si une mole est hydrolysée dans 5 min en absence de cette enzyme, quel serait le temps d'hydrolyse en présence de l'enzyme, et combien faudra-t-il à l'enzyme pour hydrolyser tout l'urée contenu dans une solution préparée en mélangeant un volume de 0.3 cm3 d'une solution d'urée avec 0.9 cm3 d'eau
Sachant que lorsqu'on ajoute à 0.5 cm3 de cette solution 4.5 cm3 du réactif de Bradford puis on laisse la coloration s'établir, l'absorbance à 595nm
est de 0.18
Parallèlement , des solutions étalons ont été réalisées à des concentration connues de protéine et 0.5 cm3 de chaque solution préparée est traitée dans les mêmes conditions avec 4.53 du réactif de Bradford
Les résultats des absorbances, à la même longueur d'onde de chaque solution sont représentés dans le tableau suivant :
C(mg/cm3) 2 4 6 8 10
A 0,065 0,121 0,178 0,251 0,298
Voilà ce que j'ai fait :
-Selon Beer-lambert :A=£lC => A= a C => C = A/a, j'ai donc calculé la tengeante après avoir dessiner le graphe A=f(C) j'ai trouvé que a= 0.03
- J'ai calculé C =0.18/0.03= 6mg/cm3
-Ensuite, c'est là que je BLOQUE et que je commence à avoir des problèmes:
1mol d'urée---> 5 minutes
x ---> 1 min x = 1/5 mol/min (c'est la vitesse initiale)
Vi/vf=108 Vf= 108.1/5 Vf = 5.108 mol/min
1/5 mol --->1min
5.108 mol---> t
t= 108 min
108 mol----->1 min
Pour passer du mol vers mg/ml : Cn = Cm/M ==>Cm =Cn.M= 108.60 Cm = 6.109 g/l= 6.1012 mg/cm3
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