Dosage d'acides aminés

[invite580170bd]

Bonjour.

Je suis sur un travail qui concerne le dosage des acides aminés plasmatiques par HPLC couplé a la fluoro, et pour ce but il me faut réaliser une gamme d’étalons a partir d'une solution mère d'acides aminés.

Le problème c'est que j'ai beau chercher je ne trouve pas la méthodologie a suivre pour cette pratique (concentration de la sol. mère, les dilutions...etc).
Pour commencer je m’intéresse au dosage de la leucine isoleucine valine et arginine.

Si quelqu'un peut m'aider ou m'orienter ver quelque chose ça serai tres aimable.

Cordialement.
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[HarleyApril]

Bonsoir

Je pense qu'il va falloir opérer par dérivatisation.
Une première réaction te permet d'accrocher un résidu fluorescent à l'acide aminé. Ensuite tu réalises l'analyse.
(il est également possible de faire des dérivatisation post colonne, mais j'aime moins).

http://www.vitis-vea.de/admin/volltext/e040026.pdf

Cordialement

Cordialement

[invite580170bd]

Merci pour votre réponse.
Effectivement j'opère avec derivatisation a l'OPA. Mais mon problème est que je n'arrive pas a trouver une méthode standardisée pour réaliser la gamme d'étalons.

[HarleyApril]

Bonsoir

La gamme d'étalon doit couvrir la plage dans laquelle vous allez réaliser vos dosages. C'est donc variable selon les analyses à réaliser.

Cordialement

[A voir en vidéo sur Futura]