Spectrophotométrie

[praline80]

On me donne l'exercice suivant:

Un mélange de deux aminoacides A et B possède une DO de 0.60 à 278 nm et 0.40 à 285 nm. Quelle est la concentration molaire des aminoacides A et B dans le mélange connaissant leur Ɛ molaire à 278 nm et 285 nm (trajet optique dans la cuve: 1 cm) ?

λ ƐA ƐB

278 4230 3684
285 1324 5840

=> Je pensais donc appliquer la formule pour les deux longueurs d'onde:

A = Ɛ * l * c

Ainsi pour 278 nm: pour 285 nm:

0.6 = 4230*1*c 0.4 = 1234*1*c
0.6 = 3684*1*c 0.4 = 5840*1*c

Mais ensuite je voulais résoudre une équation à deux inconnues mais je ne retombe sur rien de probant ....
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[Kemiste]

Bonjour.

Qu'appelles-tu "c" ? Ici tu devrais avoir deux concentrations, une pour A et une autre pour B. N'oublie pas non plus que tu as un mélange et que l'absorbance totale est la somme de l'absorbance de chaque espèce. Par exemple, pour 278 nm, c'est l'absorbance de A plus celle de B qui vaut 0.6. Commence donc par exprimer l'absorbance de A puis de B en fonction de leurs concentrations puis d'exprimer l'absorbance totale pour chaque longueur d'onde. Tu devrais avoir un système de deux équations à deux inconnues (concentration de A et concentration de B).

[praline80]

Je viens de faire cela avec c = la concentration

[Kemiste]

Je n'ai pas forcément suivi tout le cheminement, mais en utilisant les valeurs de Ca et Cb que tu trouves on retombe bien sur les valeurs d'absorbance données.

[A voir en vidéo sur Futura]

[praline80]

Merci beaucoup pour votre aide