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Protocole de TP un peu flou



  1. #1
    ana78

    Protocole de TP un peu flou

    Bonjour

    J'ai un tp de biochimie la semaine prochaine ,je suis en train de le preparer j'ai compris le but qui est de tracer des spectres d'absorption de 3 acides aminés pour etablir leur coefficient
    d'absorption molaire

    ensuite, on doit "enregistrer" le spectre d'absorption molaire d'une solution contenant du lysozyme
    et on devra etablir son coefficient d'absorption molaire puis la concentration de la solution

    Dans le protocole on nous demande de préparer les solutions d'acide aminés suivantes

    10ml d'une solution de Phe (10mM) dans le tampon phosphate 10mM
    A partir de cette solution stock,preparer 5ml d'une solution de Phe 2mM dans le tampon phosphate

    Pour les 2 autres acides aminés c'est a peu pres le meme protocole mais je voudrais d'abord comprendre ce qu'il faut faire
    Je n'ai jamais eu affaire à un protocole aussi flou
    Dois-je trouver le volume de tampon a mettre ?

    merci

    -----


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  3. #2
    kamor

    Re : Protocole de TP un peu flou

    Bonjour,
    tu dois calculer le facteur de dilution pour préparer la solution demandée

  4. #3
    ana78

    Re : Protocole de TP un peu flou

    Bonjour,

    Donc préparer une telle solution : 10ml d'une solution de Phe (10mM) dans le tampon phosphate 10mM
    A partir de cette solution stock,preparer 5ml d'une solution de Phe 2mM dans le tampon phosphate

    Reviendrai à : Prélever 2ml de la solution de Phe, puis l'introduire dans une fiole jaugée de 10ml et de compléter le volume jusqu'au trait de jauge avec la solution de tampon phosphate

    Cest cela ?

  5. #4
    Flyingbike

    Re : Protocole de TP un peu flou

    oui, sauf qu'on te demande 5mL. il faut donc prélever 1 mL et compléter a 5

  6. #5
    ana78

    Re : Protocole de TP un peu flou

    D'accord !

    la notion " a partir de cette solution stock" m'a perturbé
    je pensais qu'il fallais mélanger la solution de Phe avec celle du tampon et apres réaliser la dilution


    mais c'est bon je saurais faire pour la suite
    merci

  7. A voir en vidéo sur Futura
  8. #6
    ana78

    Re : Protocole de TP un peu flou

    Bonjour,
    j'ai une autre question concernant ce TP, mais sur la seconde partie

    Nous devions excité une solution de fluorescéine et enregistrer le spectre d'excitation
    puis enregistrer les spectres d'émission de cette molécule diluée dans différent pH.
    Plus le pH augmente et plus l'intensité de la fluorescence augmente.

    Il y a une questionque je n'arrive pas à traiter, il s'agit, de déterminer le pKa de la fluorescéine,
    or,la seule formule que je connaisse liant le pKa , est pH=pka +log(Base/Acide)et il y a trop d'inconnu


    je souhaiterais avoir une piste

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  10. #7
    nowell

    Re : Protocole de TP un peu flou

    Bonjour,

    Quel est le problème justement auquel vous désirez que l'on réponde. Effectivement comme vous les dites, vous avez la formule liant pH et pka, c'est donc tout bon...

    Cordialement
    nowell
    Si les faits ne correspondent pas à la théorie, changez les faits. (A. Einstein)

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