[Bio][L2-L3]Développement du Xenope-VegT (NC)

[piwi]

Bonjour,

Je vous propose un exercice de biologie de développement de mon cru (énoncé en pièce jointe). Sa rédaction et son esprit s'inspire de l'exercice du second concours d'entrée aux ENS que j'ai déjà proposé ici ( http://forums.futura-sciences.com/thread157126.html ). Soyez imaginatifs et ca ne devrait pas être trop difficile.
Notez qu'une question nécessite d'avoir quelques connaissances de base du les récepteurs nucléaires.

J'espère que vous prendrez plaisir à le regarder voir même à y réflechir.

Cordialement,
piwi

[piwi]

Pour la partie III il faut bien entendu mettre en relation les parties I et II et non pas II et III comme c'est ecrit.

Cordialement,
piwi

[calimeo5o]

Salut piwi

Je n'arrive pas à lire le dossier !! Snif

Si tu pouvais faire comme l'autre sujet du second concours de l'ENS, ça serait sympa !!

Merci d'avance

[piwi]

Puisqu'il semble que l'énoncé sous format word zippé soit difficile à ouvir je le reprends en plein texte.





Au travers de l’étude de la molécule VegT, on s’intéresse à la mise en place de l’endoderme et du mésoderme chez le xenope.


I. La molécule VegT
L’alpha amanitine est un inhibiteur de la transcription. Un traitement d’embryons juste après la fécondation avec une telle substance conduit à l’arrêt du développement embryonnaire au bout de 7h (environs 12 cycles de mitoses et 4 000 cellules). C’est ce qu’on appelle la transition mid blastulaire.
...1. Justifiez le terme transition.
VegT est un facteur de transcription à domaine T-Box. La chronologie de l’expression de l’ARNm codant pour cette protéine et son patron d’expression sont présentés ci-dessous (Figure 1).
...2. Analysez le document 1.A.
...3. Proposez une explication aux différentes observations que vous venez d’effectuer.
...4. Décrivez le patron d’expression de VegT. Justifiez le nom de cette protéine.
...5. Pourquoi utiliser des embryons albinos ?


Figure 1
(A) Northern blot VegT réalisé à partir d’ARN totaux prélevés à différents stades du développement. Egg : embryon 1 cellule ; 7-9 : blastula ; 11 : gastrula ; 15-18 : neurula ; 26 : têtard avec bourgeon de membre ; 38 : têtard
(B) hybridation in situ des ARNs VegT.sur des embryons albinos aux stades 3 à 5
En haut le pole animal, en bas le pole végétatif.

Des embryons au stade 2 cellules reçoivent une injection au pôle animal, soit d’ARNm synthétique quelconque, soit d’ARNm VegT. Au stade 8-9 des explants du pôle animal sont prélevés et cultivés jusqu’stade 11. Par hybridation in situ on marque un type cellulaire dont la distribution physiologique au stade 26 est illustrée en (C).


Figure 2
Hybridation in situ d’un ARNm spécifique d’un type cellulaire.
(C) Distribution physiologique au stade 26 du type cellulaire.
(D et E) explants au stade 11. (D) explants contrôles injectés avec un ARN quelconque. (E) explants injectés avec l’ARNm VegT.
...6. Quel est le type cellulaire marqué ?
...7. Proposez une fonction pour VegT


II. Spécification de l’endoderme.
Sox17est une molécule importante pour la formation de l’endoderme. Afin de démontrer une interaction entre VegT et Sox17 Un ARNm chimère est développé. Elle associe la protéine VegT au domaine de liaison des ligands du récepteur des glucocorticoïdes (VegTGR). Des explants de pôle animal traités avec cet ARNm sont prélevés au stade 9 et sont incubés avec de la cycloheximide avant de recevoir du dexamethasone, un analogue des glucocorticoïdes.

Figure 3
RT-PCR sox17 effectuée sur des explants de pole animal au stade 10.5 (moins d’une heure après le stade 9), sauf pour la colonne WE (embryon entier : whole embryo)
DEX : traitement au dexamethasone.
CHX : traitement à la cycloheximide.

...8. Expliquez le principe expérimental mis en œuvre ici pour montrer une interaction entre VegT et sox17.Notez que le fonctionnement du récepteur des glucocorticoïdes est analogue à celui du récepteur des oestrogènes.
...9. Analysez la figure 3
.10. Que concluez-vous ?


III. Induction du mésoderme.
En mettant en relation les parties I et les parties II, que pensez vous du rôle de l’endoderme dans la mise ne place du mésoderme ? Justifiez votre réponse.

[calimeo5o]

Merci beaucoup !!

J'essaierais de te faire part de mes trouvailles avant la fin de la semaine ...
Je vais voir ce qu'un ancien PCEM1 peut faire ... ... histoire de découvrir ce qui m'attend en L2 bio.

A bientôt